總蛋白試劑試盒說(shuō)明書(shū)
(雙縮脲法
)
一、測定原理:
蛋白質(zhì)多肽鏈中的肽鍵(-CONH)在堿性條件下,與銅離子絡(luò )合形成紫紅色化合物,在540nm處有最大吸收,所產(chǎn)生的絡(luò )合物顏色與蛋白質(zhì)的濃度成正比。通過(guò)與同樣處理的蛋白標準品相比較,可求出血清總蛋白的濃度。
二、試劑組成與配制:
1.測定試劑
:50mlX4瓶, 4℃避光保存。
主要成分:硫酸銅6.0mmol/L,氫氧化鈉600mmol/L,碘化鉀30mmol/L,酒石酸鉀鈉32mmol/L。
2. 校準液(68g/L)規格:1ml ,4℃避光保存。
三、樣本要求
一、血清或血漿樣本均應不溶血,在2-8℃下可保存8天。
二、操作步驟:
1、試劑配制:本試劑為液體,可直接使用
2.實(shí)驗條件:
溫度 37℃ |
試劑用量 1000ul |
波長(cháng) 540nm |
樣本用量 20ul |
反應時(shí)間 600秒 |
測定模式 終點(diǎn)法 |
注意:本試劑具有腐蝕性,請勿用口吸吸管。如果濺出,應立即用大量流水沖洗被污染部位。
3.校準及質(zhì)量控制程序:
手工操作:按下表加入試劑、校準品及樣本.
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空白管 |
校準管 |
質(zhì)控管 |
樣本管 |
TP試劑 (ul) |
1000 |
1000 |
1000 |
1000 |
37℃孵育10分鐘 |
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蒸餾水 (ul) |
20 |
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校準品 (ul) |
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20 |
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質(zhì)控品 (ul) |
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20 |
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樣本 (ul) |
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20 |
混勻,37℃下孵育10分鐘,波長(cháng)540nm,空白管調零,讀取校準管及樣品管的吸光度(A)值
4.實(shí)驗結果的計算方法:
參考值:65-80g/L
引用的參考值范圍代表本法的期望值,僅供參考,建議各實(shí)驗室驗證這一參考范圍或建立自己的參考值范圍
。
四、注意事項:
1、血紅蛋白≤2g/L、膽紅素≤342umol/L和維生素C≤0.4g/L、甘油三酯≤5.0mmol/L均不影響效果。
2、當檢驗結果≥150g/L時(shí),請用生理鹽水稀釋后在測定,結果乘以稀釋倍數。
3、試劑中含有防腐劑和穩定劑,可能存在一定的刺激作用和毒性,請勿直接接觸皮膚、眼睛。一旦接觸,立即用大量清水沖洗。請勿吞服。
4、試劑與樣本的用量可按比例進(jìn)行改變。